斑马鱼幼鱼的活动通常用速度、移动距离、迁移率以及角速度来描述。所有参数均可通过视频跟踪轻松测量。通常,根据研究,将幼鱼放在48或96孔板中,以便同时进行视频跟踪。斑马鱼行为轨迹跟踪系(DanioVision)为此类研究提供了理想的环境。继续阅读,了解更多有关斑马鱼幼鱼活性的研究实例。
斑马鱼幼鱼活动研究
帕金森氏病(PD)是仅次于阿尔茨海默氏病的第二大人类神经变性疾病。本案例中,研究的主要目的是通过使用斑马鱼生成PD动物模型,从而了解帕金森氏病的分子机制。
下载我们的免费案例研究,了解 多巴胺 对斑马鱼幼鱼运动能力的影响
实验室中经常使用多种品系的斑马鱼,其中许多是野生型斑马鱼。Van den Bos和他的同事(PLoS ONE, 2017)测试了两种常见的野生型斑马鱼,AB品系和Tupfel长鳍斑马鱼在活性和生活习性上的差异。
他们发现斑马鱼的品系差异不仅体现在形态上,强调在比较研究之间的生理和行为结果时需要小心不同品系斑马鱼之间的行为差异。
为研究不同品系斑马鱼之间的差异,研究人员使用斑马鱼行为轨迹跟踪系统(DanioVision)进行明暗测试。经过20分钟适应期后,斑马鱼经历了10分钟的黑暗 – 10分钟的亮光(3000 lux)– 10分钟的黑暗的明暗测试。通过 动物运动轨迹跟踪系统(EthoVision XT) 测量了斑马鱼从暗到亮过渡期间的最大速度,以及从亮到暗过渡期间移动的距离的变化。
斑马鱼行为轨迹跟踪系统(DanioVision)还用于测量惊厥反应。 观察箱装有用于声音/振动刺激的敲击装置,以引起斑马鱼幼鱼的惊吓反应。在强度设置为6的情况下,研究人员使用了不同的刺激间隔。惊厥反应显示为短暂的活动爆发,因此可以使用最大移动速度作为测量它的参数。
Lopes da Fonseca及其同事发现了一个与家族性帕金森氏症有关的基因突变。该基因突变在斑马鱼中也有相同的表达。 研究表明它在胚胎发育中起着至关重要的作用,部分敲除该基因导致7 dpf幼鱼具有非典型行为。该试验使用斑马鱼行为轨迹跟踪系统(DanioVision)中使用明暗测试范式(15分钟光照- 45分钟黑暗-45分钟光照)。
野生型组的行为符合预期:在黑暗阶段期间速度降低,然后在再次打开灯光后运动增加。但对敲除该基因的斑马鱼实验组的视频跟踪结果显示,在黑暗阶段开始时,斑马鱼速率通常较低,并且速度相对增加。
DYRK1A基因与唐氏综合症有关,但最近的研究表明,它在自闭症中也起作用。由于鼠类基因敲除模型的高死亡率,很难对使用大小鼠模型进行该研究。因此,Kim等人(Molecular Autism,2017)使用斑马鱼基因剔除模型进行实验,结果确实显示出自闭症迹象的结果。
研究人员使用 斑马鱼行为轨迹跟踪系统(DanioVision) 和 动物运动轨迹跟踪系统(EthoVision XT)跟踪斑马鱼成鱼和幼鱼,他们发现实验组斑马鱼的睡眠和清醒行为与野生型没有什么区别,但社交和群聚行为受到影响,表明实验组斑马鱼存在自闭症行为。
斑马鱼行为轨迹跟踪系统(DanioVision)中的一项测试是黑暗闪光测试,其中黑暗闪光脉冲用于诱发惊厥反应。光线条件在随附的动物运动轨迹跟踪系统(EthoVision XT)中进行了编程和控制。该系统可通过获取每10秒时区移动的距离来测量惊吓反应。
通过动物运动轨迹跟踪系统(EthoVision XT)在白天和晚上以30秒时间间隔测量斑马鱼的运动行为,用于评估睡眠和清醒行为。
斑马鱼幼鱼的活动和运动方式是许多研究中的测量对象。他们可以揭示有关定型和癫痫行为,昼夜节律,运动控制,运动障碍,神经发育等信息。
斑马鱼行为轨迹跟踪系统(DanioVision)是一个完整的系统,专为使用斑马鱼幼鱼进行的这类实验而设计,通常用于与药物开发,安全药理学,行为遗传学和昼夜节律有关的研究。
帕金森氏症目前仍无法治愈,最近的研究一直集中在神经修复上。在最近的研究中,Cronin和Grealy (Neuroscience, 2017) 调查了几种现有药物,例如 伊拉地平 (用于治疗高血压), 米诺环素 (抗生素), 和 雷沙吉兰 (通常与帕金森氏症药物 左旋多巴胺 一起使用)。
为了测试 伊拉地平, 米诺环素, 和雷沙吉兰 是否能保护或回复6-OHDA处理(帕金森氏症的经典模型)斑马鱼的运动能力,研究人员使用 斑马鱼行为轨迹跟踪系统(DanioVision)对斑马鱼幼鱼进行了测试。
将独立的幼鱼置于96孔板中,并在受精后5天的50分钟内以10分钟交替的明暗周期测量它们的活性。斑马鱼活性通过使用动物运动轨迹跟踪系统(EthoVision XT) 计算每分钟移动的平均距离和总移动距离测量。
研究人员发现,雷沙吉兰可恢复6-OHDA处理斑马鱼的运动功能,它还修复了多巴胺能神经元。 米诺环素还恢复了运动功能,但对大脑没有恢复作用。伊拉地平在这两个方面均未见明显改善。