随着全球对可再生能源需求的日益增长，海上风力发电场正如雨后春笋般在海洋中涌现。这些宏伟的钢铁结构长期浸泡在腐蚀性极强的海水中，如何防止它们生锈腐蚀，是一个巨大的挑战。目前，一种广泛采用的技术是“GACP”。简单来说，就是在钢结构上连接一块更活泼的金属（如铝或锌合金），让它作为“牺牲品”优先腐蚀，从而保护主体结构。然而，这个“牺牲品”在溶解过程中会向海水中释放金属元素，其中最主要的就是铝（Al）。
铝在淡水环境中对鱼类的毒性已被广泛研究，但在海洋环境中的影响却知之甚少。更关键的是，GACP系统释放的不仅仅是铝，而是一系列金属元素的“混合物”（包括锌、铟等），它们共同作用是否会对海洋生物产生更大的毒性？为了解答这个问题，本文介绍的研究采用了海洋Oryzias melastigma作为模型，探讨了氯化铝和GACP系统释放的金属混合物对鱼类从胚胎到成体的长期影响。
研究方法
研究设计分为急性毒性实验和慢性毒性实验两部分，全面评估了污染物在不同生命阶段的影响。
- 实验对象
模式生物：研究选用了Oryzias melastigma。这种小鱼体型小、世代周期短、易在实验室饲养，是环境风险评估的理想模型。
受精卵收集：研究人员从健康的成鱼中收集受精卵，经过一系列严格的消毒步骤，挑选出发育同步、健康的胚胎用于实验。
- 实验溶液的制备
本研究设置了两种暴露源，以进行比较：
- 氯化铝(AlCl₃)溶液：通过溶解AlCl₃, 6H2O于海水中，制备含铝的母液；
- GACP溶液：研究人员搭建了一个电化学装置，通过外加电流促使真实的铝基原电池阳极（成分与工业用一致）在海水中溶解，从而获得含有铝、锌、铁、铟等多种元素的真实“混合物”母液。
所有母液均经过沉淀和过滤，将这些母液稀释成一系列浓度梯度，用于后续实验。
- 急性毒性实验（胚胎-仔鱼阶段）
暴露方式：将海洋Oryzias melastigma胚胎分别暴露于不同浓度的氯化铝溶液、GACP溶液以及阴性对照（清洁海水）和阳性对照（3,4-dichloroaniline）中，持续12天，直至孵化（图1）。
观测指标：
发育毒性：每天在显微镜下观察胚胎发育情况，记录死亡率、孵化率、孵化时间以及各种形态畸形（如脊柱弯曲、心包水肿等）。
生长指标：在12天后，测量仔鱼的体长。
实验使用了诺达思的斑马鱼行为轨迹跟踪系统(DanioVision)。将仔鱼放入24孔板，适应后，经历“黑暗-光照-黑暗-光照”的特定光刺激序列。系统通过动物运动轨迹跟踪系统(EthoVision XT)自动记录仔鱼在每个阶段的运动距离、路径弯曲度和在孔中央停留的时间。评估幼鱼的运动能力和对光刺激的应激反应。
- 慢性毒性实验（从胚胎到成鱼，150天）
暴露方式：胚胎阶段同急性实验。从12天后孵化开始，将幼鱼转移至更大的养殖缸中，并继续暴露于不同浓度的实验溶液（氯化铝和GACP的多个稀释浓度）中，直至150天（图1）。
生长监测：在鱼生长到60天、90天和150天时，测量所有鱼的体重和体长；
繁殖评估：从60天开始，每天收集每个暴露缸的鱼卵，统计产卵量、受精率，评估繁殖成功率。同时，收集亲本鱼（F0代）在最高浓度组产下的受精卵（F1代），在清洁海水中培养至12天，观察其发育情况，评估跨代毒性；
成鱼行为学分析：在鱼生长到105天时，从阴性对照组和两个最高浓度组中挑选成鱼，进行一系列标准化的行为测试。所有行为测试均通过摄像机记录，并使用EthoVision XT进行自动分析，确保了数据的客观性和精确性；
群体行为测试：将6条鱼（3雄3雌）放入一个新水箱，记录其10分钟内的活动，分析每条鱼的运动距离和群体内个体间的平均距离，以评估群体的凝聚力；
探索能力测试（Z型迷宫）：将单条鱼放入一个Z型迷宫的安全区，2分钟后打开通道，记录其5分钟内的行为。分析指标包括：离开安全区的潜伏期、运动距离、进入远端区域的次数和时间等，以评估其探索欲和胆量；
自发活动测试：将单条鱼放入一个3L的观察缸中，适应10分钟后，记录其50分钟的自发运动轨迹，分析运动距离和路径弯曲度，评估其基础活动水平；
焦虑水平测试：将单条鱼放入一个狭长的新式水箱中，记录其5分钟内的垂直位置变化。分析其在上半区停留的时间和访问次数。
- 化学分析与数据统计
在整个实验过程中，定期采集水样，分别通过0.45μm滤膜过滤（测溶解态铝）和不过滤（测总铝），并精确测定水样中的铝浓度。
研究结果
经过长达150天的暴露和一系列精密的观测，研究数据揭示了一个复杂但总体令人安心的结果。
- 暴露浓度确认
化学分析结果显示，实验设置的浓度范围涵盖了从接近环境相关浓度到远高于环境浓度的水平。在最高浓度组，溶解态铝浓度达到约 190-290 μg/L，总铝浓度达到约 330-390 μg/L，这模拟了重度污染或最坏情景下的暴露水平。
- 对存活、生长和繁殖的影响有限
胚胎-仔鱼阶段：无论是氯化铝还是GACP暴露，均未对胚胎的存活率、孵化率、畸形率以及仔鱼的体长产生显著影响。仔鱼的光运动反应也基本正常。
成鱼阶段：在长达150天的暴露中，各浓度组的成鱼存活率均很高。虽然观察到一些零星且非剂量依赖性的体重/体长差异（例如，GACP最低浓度组的鱼在某些时间点反而更重，而氯化铝某个中间浓度组的鱼在150天时体重更轻），但在最高浓度组，鱼的生长与对照组相比并无显著差异。
繁殖与后代：所有暴露组的产卵量和受精率均未受到显著影响。更重要的是，最高浓度组亲本产下的F1代仔鱼，其发育、存活和行为也完全正常，表明未观察到明显的跨代毒性。
- 行为学揭示的微妙影响
尽管在生存、生长和繁殖这些传统终点上没有发现明显危害，但行为学测试揭示了潜在的微妙影响。
焦虑水平升高：在“新型水箱测试”中，暴露于最高浓度氯化铝（AlCl₃-C6）的成鱼，在上半区停留的时间显著减少，表现出更明显的焦虑样行为（图2）。暴露于GACP最高浓度的鱼也呈现出同样的趋势（尽管未达到统计学显著水平）。
群体行为改变：在“群体行为测试”中，暴露于GACP最高浓度的鱼倾向于形成更紧凑的群体，个体间的平均距离有缩短的趋势（图3）。这通常也与应激水平升高有关，因为紧张的鱼会更紧密地聚集在一起以求安全。
其他行为正常：在探索能力和自发活动测试中，所有鱼表现均正常。
总结
总结来说，本文介绍的研究表明，在环境相关浓度乃至更高的浓度下，GACP系统释放的金属混合物对海洋Oryzias melastigma的存活、生长和繁殖等基本生命活动均未构成严重威胁。但是，在高浓度暴露下，研究发现铝及其混合物会诱发海洋鱼类的焦虑样行为和群体行为的改变。 这表明污染物的影响可能是微妙且深远的，可能会影响鱼类的觅食、躲避天敌和社交互动能力，进而在种群水平上产生潜在影响。
因此，在当前的环境浓度下，GACP系统对海洋鱼类的风险有限。但同时也需要警惕：随着海上风电的快速发展，局部海域的铝输入量势必增加。未来的研究需要关注更低浓度、更长时间的暴露，并从行为变化深入到生理生化机制的研究，以更全面地评估这一新兴环境问题的风险。
参考文献
Blanc-Legendre, Mélanie, et al. “Short and long-term exposure of marine medaka (Oryzias melastigma) to an aluminum salt and to the cocktail of elements released by galvanic anode cathodic protection (GACP): impact on survival, growth, reproduction and behavior.” Aquatic Toxicology 283 (2025): 107329.
